PEPC(磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶),EC=4.1.1.31,属于羧基裂解酶家族,催化向磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)中添加二氧化碳以形成草酰乙酸。备选名称:PEPCase 1、PEPCase 3、PEPC 1、PEPC 3
PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶免疫原: KLH结合合成肽高度保守PEPC1和来自不同植物物种的序列,包括拟南芥Q9MAH0、At1g53310(PEPC 1)、Q84VW9、At3g14940(PEPC 3)。选择用于诱导该抗体的肽在该酶NP_177043.2(PEPC 4)的细菌类型中也完全保守。
艾美捷PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶 应用实例: 在4-12%NuPage(Invitrogen)LDS-PAGE上分离(1)用蛋白质提取缓冲液提取的拟南芥叶、用PEB提取的菠菜总细胞、用PEB提取的大麦总细胞、用PEB提取的玉米总细胞中的5µg总蛋白,并在PVDF上杂交1h。在室温下搅拌,在20 mM Tris、137 mM氯化钠pH 7.6和0.1%(v/v)吐温-20(TBS-T)中加入2%封闭试剂(GE Healthcare)1小时后,立即封闭印迹。在室温下搅拌,以1:10000的稀释度在一级抗体中培养印迹1h。倾析抗体溶液,将印迹短暂冲洗两次,然后在室温下搅拌,在TBS-T中洗涤一次15分钟,洗涤3次5分钟。在室温下,在2%封闭溶液中稀释至1:50 000的二级抗体(抗兔IgG-辣根过氧化物酶结合物)中搅拌1小时,培育印迹。按照上述方法清洗印迹,并根据制造商说明使用化学发光检测试剂显影5分钟。使用CCD成像仪(FluorSMax,Bio-Rad)和Quantity One软件(Bio-Rad)获得斑点图像。
Agrisera公司提供的植物领域的抗体涵盖拟南芥、莱茵衣藻、蓝藻、松柏类、硅藻、大豆、大麦、蒺藜苜蓿等等。艾美捷科技是Agrisera的中国代理商,为科研工作者提供优质的PEPC丨磷酸烯醇丙酮酸羧化酶。 |